E. D. Mytsa, L.Yu. Kokaeva, S.N. Elansky
Oomiceto Phytophthora infestans (Mont) de Bary provoca o tizón tardío, unha perigosa enfermidade de patacas e tomates. Unha das principais fontes de inóculo primario P. infestans son estruturas reprodutivas en repouso de paredes grosas - oosporas.
As oosporas híbridas formadas como resultado do cruzamento de cepas parentais xeneticamente diferentes contribúen a un aumento da diversidade xenotípica na poboación, como resultado do que se acelera o proceso de adaptación de cepas a novas variedades e funxicidas aplicados.
Formación de óspora P. infestans no campo observouse en moitos países do mundo: Rusia (Smirnov et al., 1999), Noruega (Hermansen et al., 2002), Suecia (Strömberg et al., 2001), Holanda (Kessel et al., 2002) e outros rexións. As ósporas son capaces de sobrevivir durante máis de 2 anos no chan nun estado viable (Bødker et al., 2006) e causan infección das plantas despois do inverno (Ulanova et al., 2010; Lehtinen et al., 2002).
Anteriormente demostrouse que as follas de plantas de diferentes niveis do arbusto de pataca presentan diferenzas de resistencia ao tizón tardío; aumenta das follas inferiores ás superiores. Esta tendencia non depende da idade das follas, da idade das plantas ou da variedade de patacas (Vesper et al., 2003). Ao mesmo tempo, non puidemos atopar datos sobre as diferenzas na intensidade da formación de oosporas nas follas de diferentes capas do arbusto de pataca na literatura. Non obstante, se existen esas diferenzas, deberían terse en conta cando se toman mostras de follas para a análise da formación de oosporas e cando se interpretan os resultados obtidos por outros autores. O obxectivo deste traballo foi estudar a formación de oosporas nas follas separadas de diferentes capas dunha planta de pataca, colocadas nas mesmas condicións en cámaras húmidas.
Materiais e métodos
Usamos 5 illamentos P. infestans diferentes tipos de apareamento illados das mostras afectadas traídas das rexións de Moscova, Ryazan e Leningrado. Destes, seleccionáronse 3 pares de cepas de diferentes tipos de apareamento, dando abundantes oosporas cando se probaron en medio de avea de agar.
Para probas, empregamos plantas de pataca sen virus das seguintes variedades cultivadas nun invernadoiro (nun substrato de turba): Sandrin temperán, Zorachka, Uladar, Osiris, Ilyinsky mediados do comezo, Yanka mediados da tempada.
Seleccionáronse follas simples de diferentes niveis da planta de pataca para a súa análise. Seleccionáronse tres follas do nivel inferior (4 follas compostas inferiores), tres da parte superior (3-4 follas compostas na parte superior) e tres follas do centro do arbusto. Pesáronse follas simples, fotografáronse en papel de coordenadas (para calcular o volume e a área) e despois colocáronse boca abaixo sobre a superficie de auga estéril, vertéronse 25 ml nas placas de Petri. Despois, cada folla infectouse cunha pinga dunha suspensión mixta de illados de zoosporangia A1 e A2 do tipo de apareamento. Para tres follas recollidas de cada nivel, empregouse un inóculo de tres pares diferentes de illados. Unha folla infectouse cunha mestura de inóculo dun par de illados.
Para preparar unha suspensión de zoosporangia, cultiváronse illados de diferentes tipos de apareamento en medio de avea de agar durante 7 días, despois dos cales os zoosporangios foron lavados con auga destilada estéril. A concentración de inóculo foi de 5-7 zoosporas no campo de visión do microscopio a 80x de aumento. Cada folla infectouse cunha pinga dunha suspensión mixta de zoosporangia illados tipo A1 e A2.
En todos os experimentos empregáronse 3 follas de pataca por variante. Despois da incubación durante 20 días a 18 ° C, cada folla homoxeneizouse nun morteiro con 2 ml de auga destilada. Da suspensión resultante tomáronse 3 mostras das que se prepararon preparacións para microscopía.
En cada variante examináronse 180 campos de visión, despois do cal se recalculou o número de esporas por 1 mm2 superficie da folla. Promediáronse os resultados do reconto para cada variante.
Para calcular o intervalo de confianza (μ) para un nivel de significación de 0,05, utilizouse a seguinte fórmula
onde s é a desviación estándar, n é o número de medidas, t é a constante da proba t para un nivel de significación de 0,05. Todos os cálculos realizáronse en Excel (paquete Microsoft Office).
Resultados e discusión
A inoculación de follas recollidas de diferentes capas do arbusto de pataca e colocadas nas mesmas condicións en cámaras húmidas revelou diferenzas na intensidade da formación de oosporas. En todas as variedades estudadas, o número máximo de oosporas formouse durante a inoculación de follas recollidas dos niveis inferior e medio do arbusto. Non se atoparon diferenzas significativas na formación de oosporas nas follas inferior e media.
O número mínimo de oosporas formouse nas follas da capa superior (Fig. 1).
Nas follas dos niveis inferior e medio, o número máximo de oosporas formouse nas variedades Sandrin, Ilyinsky, Zorachka, Uladar e Osiris. Formáronse algo menos intensamente nas follas da variedade Yanka. O número máximo de oosporas nas follas da capa superior observouse nas follas da variedade Uladar, entón Zorachka, Osiris, Yanka, Ilyinsky, Sandrin foron en orde decrecente, pero non todas as diferenzas foron estatisticamente significativas.
Figura: 1. Formación de oosporas nas follas de diferentes capas do arbusto da pataca. As inferiores son as follas dos tres niveis inferiores do arbusto, as superiores son 3-4 follas complexas da parte superior da planta, as medias do medio do arbusto.
As barras de erro mostran o intervalo de confianza para un nivel de significación de 0,05.
No campo, as condicións microclimáticas tamén contribúen á formación de oosporas nas follas inferiores e medias do arbusto: maior humidade, reducida insolación solar e flutuacións diarias de temperatura (Harrison, 1992). A pulverización superior produce menos pesticidas no fondo e no centro do arbusto. Para reducir a formación de esporas, deberían empregarse tecnoloxías que permitan administrar con éxito funxicidas ás partes inferior e media do arbusto. Pódense obter bos resultados empregando pulverizadores de aire turbulentos e funxicidas sistémicos que se poden estender ás partes non tratadas do arbusto.
Este traballo foi apoiado pola Russian Science Foundation (proxecto núm. 14-50-00029).
O artigo publicouse na revista "Potato Protection" (no 2, 2015)